對(duì)于研究專業(yè)人士

為了維持生命，細(xì)胞分裂、增殖和死亡，或以靜止?fàn)顟B(tài)存在。為了決定是否進(jìn)入細(xì)胞周期，細(xì)胞整合來自各種細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外信號(hào)的信息。細(xì)胞內(nèi)信號(hào)中最主要的是屬于口袋蛋白家族的蛋白質(zhì)的磷酸化，例如 p107、p130 和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白 (Rb)。從細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶 2 (CDK2) 的激活到 E2F 靶標(biāo)轉(zhuǎn)錄的結(jié)合再到 Rb 磷酸化的一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件有助于維持細(xì)胞周期進(jìn)程。1 細(xì)胞分裂后，細(xì)胞要么進(jìn)入另一個(gè)細(xì)胞周期，要么降低 CDK 活性并進(jìn)入靜止?fàn)顟B(tài)。作為對(duì)細(xì)胞凋亡過程中 DNA 損傷的反應(yīng)，細(xì)胞也在基因水平上被編程為死亡。2 細(xì)胞凋亡由 caspase 介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑觸發(fā)。細(xì)胞分裂、增殖、凋亡和死亡是生命的組成部分。

細(xì)胞周期

細(xì)胞周期有兩個(gè)主要階段：間期（有絲分裂事件之間的階段）和有絲分裂期（其中母細(xì)胞分裂成兩個(gè)遺傳上相同的子細(xì)胞）。間期具有三個(gè)不同的、連續(xù)的階段。在稱為 G1 的第一階段，細(xì)胞監(jiān)測(cè)其環(huán)境，當(dāng)收到必要的信號(hào)時(shí)，細(xì)胞合成 RNA 和蛋白質(zhì)以誘導(dǎo)生長。當(dāng)條件合適時(shí)，細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期的 S 階段并進(jìn)行 DNA 合成并復(fù)制其染色體 DNA。最后，在 G2 期，細(xì)胞繼續(xù)生長并為有絲分裂做準(zhǔn)備。

BD Biosciences為細(xì)胞周期研究提供多種試劑和資源。

細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖是由于生長和分裂而導(dǎo)致的細(xì)胞數(shù)量的增加。細(xì)胞增殖和凋亡的平衡對(duì)于發(fā)育和正常組織穩(wěn)態(tài)都很重要。許多技術(shù)用于評(píng)估細(xì)胞增殖。在細(xì)胞周期的合成 (S) 階段，DNA 聚合酶將各種核苷（脫氧腺苷、脫氧鳥苷、脫氧胞苷和胸苷）摻入新延伸的 DNA 鏈中。使用這些核苷的類似物提供了一種測(cè)量細(xì)胞增殖的方法。 5-溴-2'-脫氧尿苷 (BrdU) 是一種胸苷類似物，廣泛用于測(cè)量 DNA 從頭合成。一些細(xì)胞周期相關(guān)蛋白，例如 Ki-67，也被用作細(xì)胞增殖的指標(biāo)。熒光或非熒光細(xì)胞質(zhì)增殖染料也可用作細(xì)胞增殖的測(cè)量。3

BD Biosciences 提供 BD Horizon™ 紫色增殖染料 450 和 BD Horizon™ CFSE，分別用于使用紫色激光和藍(lán)色激光檢測(cè)細(xì)胞增殖，這有利于使用更大的面板。這樣可以使用多色流式細(xì)胞術(shù)從有限的樣品中確定更多數(shù)據(jù)。

兩種增殖染料都是非熒光酯化染料。酯基允許染料進(jìn)入細(xì)胞。一旦染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，酯酶就會(huì)裂解酯基，將染料轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物并將其捕獲在細(xì)胞內(nèi)。隨著每次復(fù)制事件，細(xì)胞中的染料量都會(huì)減少，從而形成特征圖案。

細(xì)胞凋亡和細(xì)胞死亡

細(xì)胞凋亡是一個(gè)有組織的過程，它向細(xì)胞發(fā)出信號(hào)以進(jìn)行自我毀滅以進(jìn)行細(xì)胞更新或控制異常細(xì)胞的生長。當(dāng)細(xì)胞受損或不再需要時(shí)，它們會(huì)發(fā)生凋亡或程序性細(xì)胞死亡，這是胚胎發(fā)育和組織穩(wěn)態(tài)過程中發(fā)生的正常生理過程。細(xì)胞凋亡控制受損細(xì)胞的有序死亡，而壞死是由于組織損傷而發(fā)生的，導(dǎo)致受損細(xì)胞和周圍細(xì)胞的損失。

細(xì)胞凋亡過程具有某些形態(tài)學(xué)特征。這些包括質(zhì)膜的變化（例如膜對(duì)稱性的喪失和膜附著的喪失）、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的濃縮、蛋白質(zhì)裂解和 DNA 的核小體間裂解。在該過程的最后階段，垂死的細(xì)胞分裂成凋亡小體，并因此被吞噬細(xì)胞消除，而不會(huì)對(duì)周圍細(xì)胞造成明顯的炎癥損傷。

通過細(xì)胞制劑類型檢測(cè)凋亡或死亡細(xì)胞（活力）的方法。

然而，某些細(xì)胞類型不表現(xiàn)出細(xì)胞凋亡的特征。在這些情況下，可能需要分析細(xì)胞凋亡的多個(gè)方面，以確認(rèn)細(xì)胞死亡的機(jī)制。

為了滿足這些要求，BD Biosciences 提供了很多方面的 細(xì)胞凋亡檢測(cè)工具和技術(shù) ，用于測(cè)量細(xì)胞凋亡過程中不同階段的指標(biāo)。

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