發(fā)布時(shí)間: 2026-02-26 點(diǎn)擊次數(shù): 44次
在細(xì)胞生物學(xué)、組織工程和再生醫(yī)學(xué)研究中,將組織或細(xì)胞團(tuán)塊有效、溫和地解離為單細(xì)胞懸液,是進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)、分選、轉(zhuǎn)染或測(cè)序等實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵第一步。傳統(tǒng)胰蛋白酶雖應(yīng)用廣泛,但對(duì)某些敏感細(xì)胞(如干細(xì)胞、原代神經(jīng)元、類(lèi)器官)易造成損傷。為此,Sigma公司開(kāi)發(fā)了多種特殊培養(yǎng)物解離試劑,針對(duì)不同細(xì)胞類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)需求提供精準(zhǔn)解決方案。了解這些Sigma代理試劑的種類(lèi)與特點(diǎn),有助于科研人員優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程、提高細(xì)胞活性與得率。 一、Accutase®:溫和高效的通用型解離酶
Accutase®是Sigma受歡迎的非動(dòng)物源性解離試劑之一,由蛋白水解酶和膠原酶活性成分復(fù)合而成。其主要優(yōu)勢(shì)在于作用溫和、無(wú)需中和——解離完成后可直接離心去除,不會(huì)殘留毒性。特別適用于貼壁性較強(qiáng)的細(xì)胞系(如HEK293、CHO)、人胚胎干細(xì)胞(hESCs)及誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs),能有效維持細(xì)胞表面標(biāo)志物完整性和多能性。
二、Collagenase(膠原酶)系列:專(zhuān)攻結(jié)締組織與實(shí)體瘤
膠原是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的主要成分,尤其在肝臟、胰腺、腫瘤等組織中含量豐富。Sigma提供多種純度與特異性的膠原酶,如:
Collagenase Type I:含較高胰蛋白酶活性,適合上皮、肝、腎等軟組織;
Collagenase Type IV:低胰酶活性,適用于胰島細(xì)胞、乳腺組織等對(duì)蛋白酶敏感的樣本;
Liberase™TL/TH Research Grade:高純度、無(wú)動(dòng)物源成分的重組膠原酶,批次穩(wěn)定性佳,常用于臨床前研究和GMP級(jí)細(xì)胞制備。
使用時(shí)通常需與中性蛋白酶(如Dispase)或透明質(zhì)酸酶聯(lián)用,以協(xié)同降解多種ECM成分。
三、TrypLE™:胰蛋白酶的理想替代品
TrypLE™是一種重組真菌來(lái)源的絲氨酸蛋白酶,功能類(lèi)似胰蛋白酶,但不含動(dòng)物源成分、pH穩(wěn)定性更好、作用更溫和。它能在室溫下快速解離多種貼壁細(xì)胞,且對(duì)細(xì)胞膜受體損傷小,解離后細(xì)胞恢復(fù)快。廣泛用于常規(guī)細(xì)胞傳代及流式細(xì)胞術(shù)前處理。
四、StemPro®Accutase®與Gentle Cell Dissociation Reagent(GCDR)
針對(duì)干細(xì)胞和類(lèi)器官,Sigma還推出更精細(xì)化的產(chǎn)品。例如Gentle Cell Dissociation Reagent是一種無(wú)酶、化學(xué)成分明確的解離液,通過(guò)螯合鈣鎂離子破壞細(xì)胞間連接,適用于形成緊密球狀結(jié)構(gòu)的神經(jīng)球或腸類(lèi)器官,能最大限度保留細(xì)胞完整性與功能。
五、選擇建議與注意事項(xiàng)
選擇解離試劑應(yīng)綜合考慮:
細(xì)胞類(lèi)型(原代/傳代、上皮/間充質(zhì));
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ㄊ欠裥璞3直砻婵乖??是否用于移植?)?/span>
是否要求無(wú)動(dòng)物源成分(xeno-free);
解離時(shí)間與細(xì)胞存活率的平衡。
此外,所有解離過(guò)程應(yīng)在37℃嚴(yán)格控時(shí),避免過(guò)度消化;解離后建議用含血清或抑制劑的培養(yǎng)基及時(shí)終止反應(yīng)(除Accutase等免中和試劑外)。
Sigma提供的多樣化特殊解離試劑,為現(xiàn)代細(xì)胞研究提供了“量體裁衣”式的工具選擇。從通用型Accutase到高純度Liberase,從酶解到非酶解方案,科研人員可根據(jù)具體需求精準(zhǔn)匹配,既提升實(shí)驗(yàn)效率,又保障細(xì)胞質(zhì)量。在追求可重復(fù)性與高標(biāo)準(zhǔn)的今天,合理選用解離試劑,已成為高質(zhì)量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)不可少的一環(huán)。